Правам EGFR 29 генетические мутации комплект для обнаружения (PCR) в режиме реального времени Использование по назначению Данная проверка используется для in vitro качественного определения общих мутаций в exons 18-21 от EGFR гена в образцы из прав не небольшие клетки рака легких пациентов (обратитесь к таблице 1 для получения подробной информации) Рак легких стала основной причиной смерти от рака в мире, создает серьезную угрозу для здоровья человека. Среди больных раком легких, небольшие клетки рака легких приходится около 80%. В настоящее время EGFR наиболее важных молекулярной целевой показатель в отношении обращения с небольшие клетки рака легких. Фосфорилирования от EGFR может способствовать росту клеток опухоли, дифференциация, вторжения, metastasis, апоптоз, и поощрять angiogenesis опухоли. Выключатель блокировки kinase EGFR tyrosine TKI) могут блокировать сигнал EGFR transduction канал на затруднение autophosphorylation EGFR и тем самым препятствует распространению и дифференциации клеток опухоли, апоптоз клеток опухоли, уменьшение опухоли angiogenesis и т.д., с тем чтобы добиться восстановления опухоли. Целенаправленной терапии [1]. Большое число исследований показали, что терапевтическая эффективность EGFR-TKI имеет непосредственное отношение к положению EGFR генетические мутации, и в частности запрет на рост опухолевых клеток с EGFR генетические мутации [2~3]. В гена EGFR расположен на короткий рычаг в хромосоме 7 (7p12), с полной длины 200Кб, состоящий из 28 exons. Мутации в регионе является в основном находится в exons 18-21, среди которых на exon codons 746-753 19 отсутствуют мутаций приходится около 45% мутаций и L858R мутации на exon 21 приходится около 40% к 45% [4]. "NCCN руководящих принципов для диагностики и лечения рака легких ячейки Non-Small" четко говорится о том, что мутации гена EGFR тестирование перед EGFR-TKI лекарства. Этот комплект используется для проверки по лекарственным средствам кожная оболочка фактором роста приемника kinase EGFR tyrosine выключатель блокировки подушки безопасности (с) TKI наркотиков, и для обеспечения основы для персонализированной медицины для пациентов с небольшие клетки рака легких. Этот комплект используется только для выявления общих мутаций в гена EGFR у пациентов с небольшие клетки рака легких. Результаты проверки для клинических только для справки и не должно использоваться в качестве единственной основы для индивидуального лечения пациентов. Врачи должны сочетать состояние пациента, указания по контролю над наркотиками и лечения таких факторов, как реакцию и других лабораторных показателей проведения всеобъемлющего решения о результатах теста. Принцип проверки Этот комплект для обнаружения использует PCR обогащения, оружие (усиление огнеупорного мутации) технологии и датчик Taqman комбинированный метод для обнаружения L858R, 19дель и других общих EGFR мутаций. По обогащению мутации мест PCR, разрешение и чувствительность обнаружения в дальнейшем усовершенствовании. Taqman зонды имеют маркировку с репортером fluorophore FAM и quencher fluorophore BHQ2. Если датчик исправен, люминесцентное освещение информации о столкновении от reporter группа поглощается quenching группы; во время усиление PCR, 5'3' exonuclease деятельности Хасайн Так фермента расщепляет и унижают зонд, в результате чего журналист флуоресцентный группы и quenching fluorophore отделяется, с тем чтобы флюоресценция система мониторинга может получать флюоресценция сигнал. Система PCR обогащения решение снижает дикого типа фон последовательности путем ограничения фермента пищеварение, а также улучшает разрешение и чувствительность обнаружения. Характеристики оружия метод: Хасайн Так ДНК Полимеразной, у которого нет 3'5' exonuclease деятельности, может конкретно признается 3 в конце грунтовки. Только при 3 в конце грунтовке полностью соответствует может фрагмент на мутации сайт усиливаются нормально. Когда 3 в конце грунтовка несоответствие, она не может быть эффективно усиливаются. Таким образом, с помощью этого метода можно избирательно усиливает mutant последовательности и Taqman датчик находится в сочетании с усилителем для идентификации продукта target последовательность мутации. Выбранная область обнаружения в результате внутреннего контроля реакции - это относительно консервативный сегмент exon 2 в области гена EGFR около 120 bp, как контроль качества для реагентов, ДНК, качества и самой операции. Даже если ДНК может снизиться производительность, внутренний контроль не может быть действительно реагируют на системе. Эффективное количество ДНК в гена. Системы обнаружения содержит определенную долю dUTP, dNTP и ДНК (UDG uracil glycosylase фермента), этот энзим (также называется uracil-N-glycosylase или УНГ фермента) может прервать ПЦР с dUTP продукта, тем самым предотвращая загрязнение PCR.